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SV-HUC-1細胞復蘇平衡后怎樣判斷其狀態

發布時間:2022-12-19瀏覽:244次

細 胞 基 本 信 息



細胞名稱:SV-HUC-1(人輸尿管上皮永生化細胞)

細胞別稱:HUC-1; SV-HUC; SVHUC

細胞類型:上皮細胞

生長特性:貼壁

培養條件:F12K+10% FBS+1% P/S

培養環境:空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%

細胞簡介:SV-HUC-1細胞是11歲男性的正常輸尿管組織用SV40病毒轉染建株的,細胞尿上皮角蛋白、SV40 T抗原陽性。SV-HUC-1細胞經反復用非洲綠猴腎細胞平板測試檢測傳染性SV40,結果都呈陰性,但在脅迫(如曝露于化學試劑)下可能激活SV40病毒。SV-HUC-1細胞可以用于3D細胞培養。

SV-HUC-1細胞正常生長形態照片(40x、100x)







SV-HUC-1細胞 操 作 實 例




客戶提問:

SV-HUC-1細胞 剛收到的復蘇細胞平衡后  麻煩看下狀態


小尚回答:

目前從圖片上觀察細胞狀態良好,密度在80%左右,平衡完成后及時消化傳代,初次傳代建議1:2傳代。該細胞消化時間較長,注意延長消化時間。對于消化這步,客戶如果對該細胞經驗不多,無法準確掌控胰酶作用時間,建議客戶按照下述操作:

胰酶首先復溫到室溫后加入細胞,放入37度培養箱,然后每隔30秒,即吹打下細胞(此時吹打細胞應盡量輕柔,不能強行將細胞吹下,否則細胞可能出現機械損傷),如果能夠吹打散細胞,說明細胞消化完成可以終止消化,如果30秒吹打不下,再等30秒重復操作。

消化完成后加3-4ML培養基終止消化,混勻細胞,收集細胞懸液900-1000rpm離心3min,棄上清。再加5ml PBS重懸細胞,再離心后,用培養基重懸接種到新的培養皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗一次。

傳代24h后可以觀察細胞,若死亡細胞及碎片較多建議PBS潤洗下貼壁的細胞,再加新的培養基繼續培養。


注 意 事 項




SV-HUC-1細胞對pH值敏感,注意加多些培養基培養,培養變黃后及時換液。平時培養建議T25瓶加10ml培養基,10cm皿加12-15ml,密度60%以下2-3天換液一次,密度60-80%時隔一天換液一次,80%以上每天換液。以維持相對穩定的培養條件。特別是密度高的時候,留意培養基是否變黃,培養基變黃要及時換液。


圖片


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