細胞基本屬性
細胞名稱：UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細胞)
細胞別稱：UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF1; UMNSAH/DF#1; DF-1; DF1; Douglas Foster-1
細胞類型：成纖維細胞
生長特性：貼壁
培養條件：DMEM+10% FBS+1% P/S
培養環境：空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%
細胞簡介：UMNSAH/DF-1細胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞成纖維細胞株，自發永生化。分離的原代雞胚成纖維細胞在培養液中培養，傳代直到衰老，在培養過程中保持細胞在30%到60%密度，不衰老的克隆進行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒有觀察到克隆增殖，說明UMNSAH/DF-1細胞是永生化而沒有轉化。UMNSAH/DF-1細胞可作為病毒增殖、重組蛋白表達和重組病毒生產的基質。
客戶養的UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細胞，現在是第5次傳代，這次是1:3傳代，用的是上圖胰酶1毫升，消化2一3分鐘，反饋是此次傳代的第2天很多細胞不貼壁，幫忙看一下。
小尚解答
消化時間太長了，該細胞消化時間短，注意控制消化時間及吹打力度。細胞消化至變圓可以輕松吹下時即可終止消化，不能消化至漂浮。對于消化這步，客戶如果對該細胞經驗不多，無法準確掌控胰酶作用時間，建議客戶按照下述操作：
胰酶首先復溫到室溫后加入細胞，放入37度培養箱，然后每隔30秒，即吹打下細胞（此時吹打細胞應盡量輕柔，不能強行將細胞吹下，否則細胞可能出現機械損傷），如果能夠吹打散細胞，說明細胞消化完成可以終止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重復操作。消化完成后加3-4ML培養基終止消化，混勻細胞，收集細胞懸液900-1000rpm離心3min，棄上清。再加5ml PBS重懸細胞，再離心后，用培養基重懸接種到新的培養皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗一次。傳代24h后可以觀察細胞，若死亡細胞及碎片較多建議PBS潤洗下貼壁的細胞，再加新的培養基繼續培養。
2.目前細胞活力較差，死細胞偏多，建議靜置培養一天看一下，若明天細胞仍然不貼壁就不建議繼續培養了。若有保種的凍存細胞可以重新復蘇培養。
產 品 推 薦
1
【SNL-006】UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細胞)
2
【SNLM-006】雞胚成纖維細胞專用培養基
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